基金项目: 安徽省重点研究与开发计划项目(编号:202104j07020005);安徽省高校自然科学研究项目(编号:2023AH010084、2022AH052030);安徽医科大学临床医学院校级自然科学研究项目(编号:2020XJ018);
作者:汪碧君;崔浩东;吴文涌
关键词:DPP7;肝细胞癌;增殖;转移;EMT;MHCC97H;
DOI:专辑:医药卫生科技
〔摘 要〕 目的 探究二肽基肽酶7(DPP7)在肝细胞癌的发生发展机制。方法 通过UALCAN及GEPIA数据库、免疫组织化学染色法和蛋白免疫印迹实验检测肝癌组织及肝脏正常组织中DPP7蛋白表达情况并分析其临床病理特征之间的关系;选用siRNA沉默DPP7的表达,并通过Westernblot、实时定量PCR(qPCR)法检测肝癌细胞MHCC97H中DPP7表达量;使用四唑盐比色法(MTT)、克隆形成及划痕愈合实验检测细胞增殖情况;Transwell法检测细胞的侵袭、迁移能力;通过Westernblot检测上皮间充质转化(EMT)相关蛋白标志物的变化情况。结果 UALCAN、GEPIA数据库及临床肝癌组织样本中,DPP7蛋白表达上调,且与肝癌患者的TNM分期(P=0.002)、淋巴结转移(P=0.038)及肿瘤浸润深度(P=0.027)密切相关;实验组转染siRNA后,MHCC97H细胞株中的DPP7蛋白及mRNA表达量下调(P<0.01),且MTT法、克隆形成实验、划痕实验、Transwell法结果显示MHCC97H细胞株的增殖和转移能力受到抑制;EMT相关蛋白检测显示上皮细胞标志物E-cadherin表达增加(P<0.001),而间充质标志物Vimentin、N-cadherin表达下降(P<0.01)。且MTT法、克隆形成实验、划痕实验、Transwell法结果显示:敲低MHCC97H细胞株的DPP7表达后,细胞的增殖和转移能力受到抑制;EMT相关蛋白检测显示上皮细胞标志物E-cadherin表达增加(P<0.001),而间充质标志物Vimentin、N-cadherin表达下降(P<0.01)。结论 DPP7在肝细胞癌组织和肝癌细胞株中呈高表达并与患者不良预后相关,下调DPP7蛋白表达可抑制肝癌细胞株MHCC97H的增殖、转移能力,其作用机制与EMT密切相关。