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不完全型胚胎着床障碍模型小鼠滤泡辅助性T细胞占比及功能相关细胞因子表达水平分析

安徽医科大学学报     字体:

基金项目: 河南省免疫与靶向药物重点实验室开放课题(编号:HNKLITD2024001); 省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室开放课题(编号:SKL-HIDCA-2024-GX2);自治区卫生健康科技计划创新科研项目(编号:2025001CXKYXM650030870);

作者:王鹏;巩晓芸;张曼丽;张于念;腊晓琳

关键词:滤泡辅助性T细胞;胚胎着床障碍;趋化因子受体5蛋白;B细胞淋巴瘤分子6蛋白;细胞因子;子宫内膜容受性;

DOI:专辑:医药卫生科技

〔摘 要〕 目的 检测不完全型胚胎着床障碍(EID)模型小鼠脾脏滤泡辅助性T(Tfh)细胞比例及其功能相关的细胞因子表达水平,探讨Tfh在EID导致的不孕症中的免疫学机制。方法 将16只雌性昆明小鼠随机均分为2组,于妊娠第4天利用米非司酮混悬液灌胃的方式建立不完全型EID小鼠模型,Control组给予等量生理盐水;于妊娠第8天处死小鼠,采用流式细胞术检测不完全型EID组和Control组小鼠脾脏淋巴细胞内Tfh细胞水平,qRT-PCR检测两组小鼠脾脏淋巴细胞中B细胞淋巴瘤分子6(Bcl-6)和趋化因子受体5(CXCR5)mRNA水平,Westernblot检测两组小鼠脾脏淋巴细胞中Bcl-6和CXCR5蛋白表达水平,ELISA法检测血清白细胞介素4(IL-4)、IL-6和IL-21水平,免疫组织化学法(IHC)检测两组小鼠子宫内膜组织孕激素受体(PR)、Bcl-6和CXCR5蛋白的水平。结果 不完全型EID小鼠胚胎着床点数降低,子宫内膜PR受体表达降低。流式检测结果显示,不完全型EID小鼠脾脏淋巴细胞中CD4+CXCR5+Tfh细胞比例显著高于Control组(P<0.05)。与Control组相比,不完全型EID组小鼠脾脏淋巴细胞Bcl-6和CXCR5mRNA水平和蛋白水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05);不完全型EID组小鼠血清IL-4、IL-6和IL-21水平均增高,子宫内膜中Bcl-6和CXCR5蛋白显著升高(P<0.05)。结论 Tfh细胞及其相关细胞因子Bcl-6和CXCR5的增加与不完全型EID的发生有关,可能参与女性免疫性不孕的发生。