〔摘　要〕 目的 评估基于CAMP因子基因（cfb）的荧光定量PCR（qPCR）检测无乳链球菌出现假阴性的原因，并深入分析其分子机制。方法 收集76例阴道分泌物标本，分别采用靶向cfb的qPCR法和细菌培养法进行检测。对4例qPCR阴性但培养阳性的可疑菌株，通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）、乳胶凝集抗原检测和CAMP试验进行鉴定；利用MGI DNBSEQ-T7和Nanopore-PromethION 48测序平台进行全基因组分析；基于16S rRNA基因构建系统发育树和环形进化树进行菌株确认；进行多位点序列分型（MLST）；基于拼接序列和原始数据，对cfb序列进行比对分析；设计cfb特异性引物进行全长扩增及琼脂糖凝胶电泳验证。结果 4株可疑菌株经MALDI-TOF MS、抗原检测及16S rRNA基因分析均确认为无乳链球菌，MLST分型均为ST862型。CAMP试验阴性，全基因组序列比对未发现cfb或其同源序列，cfb特异性PCR扩增无产物，分子层面确认cfb完全缺失。结论 无乳链球菌cfb的完全缺失是导致基于该靶标的qPCR检测假阴性的分子机制。提示以单一cfb为靶标的qPCR检测存在局限性，可能影响临床诊断和治疗决策，需引起重视。