〔摘　要〕 目的 对IL9-2G1兔单克隆抗体（IL9-2G1mAb）进行可变区人源化改造，并鉴定其生物学活性。方法 设计IL9-2G1mAb的人源化抗体序列，对抗体重链可变区（VH）与轻链可变区（VL）进行人源化改造，同时构建至含有人源IgG1亚型、IgKappa亚型恒定区骨架载体模板，采用中国仓鼠卵巢细胞（CHO）表达系统进行纯化实验，酶联免疫吸附试验（ELISA）对抗体与抗原结合活性进行定性分析，筛选出最优人源化抗体后进行表面等离子体共振（SPR）亲和力检测。Westernblot检测rIL-9组与rIL-9+hIL-9mAb组对Janus激酶1/信号转导与转录激活因子3（JAK1/STAT3）磷酸化的影响，ELISA检测Th9组与Th9+hIL-9mAb组对白细胞介素-9（IL-9）分泌的影响。结果 纯化及ELISA显示，重链OH与轻链FL兼容性及表达良好；SPR结果显示，M501042-OH-FL与分析物M30903的平衡解离常数（KD）为1.33×10^-7 M，优于亲本2G1抗体；Westernblot结果显示，与rIL-9组相比，rIL-9+hIL-9mAb组中磷酸化JAK1（p-JAK1）与磷酸化STAT3（p-STAT3）水平显著下调（P<0.01）；ELISA结果显示，与Th9组相比，Th9+hIL-9mAb组中IL-9分泌显著下调（P<0.01）。结论 对IL9-2G1兔单克隆抗体可变区进行人源化改造，成功构建获得亲和力高、结合稳定性强的hIL-9 mAb OHFL，为后续研究提供实验基础。