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改良组织块贴壁法培养大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞及鉴定

安徽医科大学学报     字体:

基金项目: 国家自然科学基金项目(编号:82474319、82405412);

作者:张焘;余茂彬;刘美君;马紫阳;张培海

关键词:大鼠;阴茎海绵体平滑肌细胞;平滑肌肌动蛋白;体外模型;细胞培养;免疫荧光;组织块贴壁法;

DOI:专辑:医药卫生科技

〔摘 要〕 目的 使用改良后的组织块贴壁法构建大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMCs)体外培养模型。方法 分离大鼠阴茎海绵体组织,先用Ⅰ型胶原酶消化大鼠阴茎海绵体平滑肌组织块再贴壁培养,差速贴壁法对细胞进行纯化,免疫荧光染色法和Western blot对其进行鉴定。结果 改良组织块贴壁法培养CCSMCs 3 d后可见少量细胞从组织块中游出,7 d后细胞大量从组织块游出,12 d细胞融合,传代后细胞增殖旺盛,呈“峰-谷”样生长。细胞经差速贴壁纯化后,免疫荧光染色和Western blot法鉴定为α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性,提示大鼠CCSMCs体外培养模型建立成功。结论 改良组织块贴壁法能够快速得到纯度较高的CCSMCs,是一种经济便捷获得CCSMCs的方法。