基金项目: 国家自然科学基金(编号:81903994); 安徽医科大学附属第一附属医院临床研究重点项目(编号:LCYJ2021ZD005);
作者:张宇豪;赵杰;孙业祥
关键词:黄芪救逆汤;严重烧伤;急性肝损伤;网络药理学;炎症;
DOI:专辑:医药卫生科技
〔摘 要〕 目的 利用动物实验及现代药理学工具来探讨黄芪救逆汤(HQJND)对于严重烫伤大鼠急性肝损伤的影响和可能分子机制。方法 首先建立脓毒症大鼠模型,随机分成4组,生理盐水组使用生理盐水灌胃1 mL/次,每日2次,中药组使用浓缩黄芪救逆汤1 mL/次,每日2次,72 h休克期后处死取材,随后检测血清肝功能和苏木精-伊红(HE)染色,验证该药物的疗效。假手术组及脓毒症组正常饲养,不进行任何特殊处理。然后利用网络药理学筛选药物和药物反应的靶点,预测在疾病治疗过程中可能起作用的信号通路。最后进行荧光定量PCR(RT-qPCR)检测基因表达,蛋白质印迹(WB)检测肿瘤坏死因子-α(TNFα)、P65蛋白(P65)、磷酸化P65蛋白(P-P65)以及免疫组织化学(IHC)检测来验证药物疗效并探索药物治疗机制。结果 大鼠血清肝功能和组织病理学显示,使用HQJND可显著改善严重烧伤大鼠的肝功能。采用网络药理学筛查鉴定353个疾病相关标记基因和286个药物靶点,预测肿瘤坏死/NF-κB因子通路(TNF/NF-κB通路)可能为HQJND治疗严重烧伤急性肝损伤的关键途径。IHC检测的结果显示,脓毒症组相比于假手术组及中药组,大鼠肝脏中TNFα的IHC染色显色更多。RT-qPCR与WB结果显示,与假手术组和中药组相比,脓毒症组大鼠肝脏中TNFα、TNFR1和P65蛋白的表达显著升高;相反,假手术组和中药组中IKBα的表达水平较高,表明药物治疗有效抑制了TNF/NF-κB信号通路的激活,减轻了炎症反应,从而缓解了组织损伤。结论 动物实验及网络药理学结果证实,HQJND对于严重烧伤大鼠的急性肝损伤具有一定的保护作用,这一作用可能与抑制TNF/NF-κB信号通路有关。