〔摘　要〕 目的 建立一种基于5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)和5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)双标记法检测细胞周期S期时间(Ts)和总细胞周期时间(Tc)的方法。方法 通过EdU和BrdU双重标记HEK293T细胞后进行免疫荧光染色，利用高内涵细胞成像分析仪采集荧光信号，统计整个细胞群中EdU阳性和BrdU阳性细胞个数，基于之前发表文章中的细胞周期计算公式，对其进行改进后，可精准计算出细胞的Ts和Tc时长，并利用建立的方法对人胚胎干细胞细胞周期时长进行计算。结果 根据EdU/BrdU双标记的方法计算出人胚胎干细胞的Ts为10.9 h, Tc为15.3 h。结论 基于EdU/BrdU双标记法能检测出细胞的Ts和Tc时长，是一种可以精准高效检测细胞周期的方法。