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作者:冯晓亮;刘伟;黄升海;
关键词:呼吸道合胞体病毒感染/病理学;;免疫组织化学;;氧化还原酶类/遗传学
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2009.01.010
〔摘 要〕 目的研究呼吸道合胞病毒(RSV)感染Balb/c鼠及A549细胞(人肺腺癌上皮细胞)COX-2表达的变化,初步探讨COX-2在RSV感染所致炎性反应中的作用。方法以1×106PFU/mlRSV感染体外培养的A549细胞,在感染后8、16和24h,采用免疫细胞化学法检测COX-2蛋白表达;以1×106PFU/mlRSV滴鼻感染Balb/c鼠,在感染后24、48和96h,用免疫组化法检测肺组织COX-2蛋白表达,并对肺组织切片行HE染色;以未感染病毒的Balb/c鼠及A549细胞作正常对照。采用生物图像分析系统对免疫组化和免疫细胞化学结果进行COX-2定量检测。用TRIzol提取肺组织和A549细胞总RNA,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测COX-2 mRNA表达的变化。结果正常细胞对照组中,A549细胞COX-2 mRNA和蛋白有微弱表达,经由RSV感染后,A549细胞COX-2 mRNA和蛋白有高水平表达,差异有显著性(P<0.05),且随着感染时间的延长,其表达量逐渐增加。正常鼠肺组织中COX-2 mRNA和蛋白仅有微弱表达,RSV感染后,COX-2 mRNA和蛋白表达水平随感染时间延长而增加,差异具有显著性(P<0.05);HE染色显示肺组织炎症随感染时间延长而加重,且COX-2的表达水平与肺组织炎症严重程度相一致。结论RSV感染可诱导肺组织及A549细胞高水平表达COX-2 mRNA和蛋白,并可能参与RSV感染引起的肺组织炎性反应。